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技术支持:库价化学
M-MLV 反转录酶是一种以单链 RNA、DNA 或 RNA:DNA 杂交体为模板合成互补 DNA 链的重组 DNA 聚合酶。与 AMV RT 相比,莫洛尼鼠白血病病毒反转录酶 (M-MLV RT) 缺乏 DNA 核酸内切酶活性,RNase H 活性较低。该酶的特点:
•热稳定性—在 37°C 下活性极佳
•cDNA 大小—M-MLV 可用于合成长达 7 kb 的第一链 cDNA
•应用—合成第一链 cDNA、引物延伸、dsDNA 测序、cDNA 文库和 RT-PCR
来源
纯化自表达质粒所带 M-MLV pol 基因的大肠杆菌
性能和质量检测
SDS-PAGE 纯度;脱氧核糖核酸内切酶、脱氧核糖核酸外切酶及核糖核酸酶检测;cDNA 产物的得率和长度
单位定义
一个单位的 M-MLV RT 是指在 37°C、10 分钟条件下使用 poly(A)oligo(dT)25 作为模板-引物将 1 nmole 脱氧核糖核酸掺入酸性可沉淀材料所需的酶量。
单位反应条件
50 mM Tris-HCl(pH 值 8.3)、40 mM KCl、6 mM MgCl2、1 mM DTT、0.5 mM [3H]dTTP、0.1 mM poly(A)、0.1 mM oligo(dT)25、0.1 mg/mL BSA 和酶,50 µL,10 min,37°C。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。